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凝血酶原时间标准曲线半定量测定纤维蛋白原含量的方法的临床应用

hc360慧聪网医疗器械行业频道 2004-09-07 22:13:16

[摘要]目的：利用Control plasma建立一种简便、易于临床实验室开展的半定量纤维蛋白原(FiB)检测方法，并对其初步评价。方法：用亚硫酸钠手工法检测不同浓度FiB Reference plasma血浆的FiB含量，用其为参比血浆，用半自动血凝仪测其PT凝固时间及吸光度，建立PT凝固时间(s)参比血浆浓度(％)的曲线1，及FiB含量(g/L)与吸光度(E)的标准曲线2。利用标准曲线测定待检血浆FiB的含量(g/L)。结果：血浆FiB含量与PT(s)及吸光度(E)有很好的相关性(r=0.992)。单种试剂本法测定Control PLasma血浆FiB值，重复性良好(CV<2％)。本方法测定结果与手工法测定结果有很好的相关性(r=0.981)。结论：本方法能检测患者血浆的FiB值，用半自动血凝仪检测PT时，简便，易行，重复性较好。对溶栓患者有很好的监测效果。 [关键词]凝血酶原时间；凝固法；纤维蛋白原；标准曲线；吸光度半自动血凝仪可同时对5个参数进行测定，利用凝固法+FiB测定，制定标准曲线进行半定量检测FiB，简便，易行，建立一种直接检测FiB含量的方法。 1 材料与方法 1.1 仪器和试剂 1.1.1 仪器Thromboscreen400CB半自动血凝仪(美国)721比色仪37℃水浴箱。 1.1.2 试剂兔脑凝血活酶 Tromboplastin-DSP／N 535301 FiB Reference plasma Human 560502。仪器定标血浆Standard Human P1asma(美国)，DADE BEHRINC公司，ORKL25。质控血浆Level Ⅰ，LevelⅡ (美国)DADEBEHRINC公司。 1.2研究对象及标本处理 1.2.1 研究对象随机抽取50例正常健康体检人，其中男32例，女18例，平均32岁(21-43)。 1.2.2 临床标本处理顺利抽取静脉血1.8mL血，注入0.2mL枸橼酸钠(0.38％)的塑料试管，混匀，1000转离心5min，分离血浆，PT检测2h完成。 1.3 方法。 1.3.1 FiB检测方法手工法测不同浓度Control plasma血浆，方法按说明进行。 1.3.2 FiB直接检测方法：用半自动血凝仪对不同浓度的Control plasma血浆测定PT凝固时间及吸光度，重复三次，取均值，建立不同浓度及其PT凝固时间，吸光度，FiB含量的曲线。待检血浆FiB含量测定：按仪器说明书测定待检血浆的PT时间及吸光度，利用曲线直接得到FiB含量。 2 结果 FiB参比血浆FIB值的效正及FiB标准曲线的制备。 2.1 方法学简单评价 2.1.1 线性分析，从标准曲线上看到，FiB值在1.0-4.5范围内，与其测定PT时的吸光度有很好的线性关系。 2.1.2 同一试剂重复性测定，按上述FiB直接测定法，用Thromboplastin-DS凝血酶将FiB参比血浆重复测定10次，计算CV值，五瓶参比血浆(FiB)测定结果为：2.03，1.85，1.93，1.95。可见手工法与直接法测定较接近。2.2 临床标本检测，用Thromboplastin-DS凝血活酶试剂直接测定法，手工法测定患者FiB，结果显示两方法之间有很好的相关性(r=0.99)。将本方法与手工法结果进行t检验，表明本方法检测的FiB值接近手工检测值，t为0.583，p为0.023，无明显差异。 3 讨论本文建立的FiB测定法只须用标定了FiB值的冻干参比血浆建立FiB对PT(s)及吸光度的标准曲线，因而容易在临床实验室开展，实验结果显示该方法测定的FiB值接近测定血浆的真值，简便，易行。但该方法由于采用的是凝固法，因此溶血及黄疸的标本不易用本法测定。影响吸光度的测定，由于本法是在单一实验室完成，本方法临床实用性尚须多家实验室共同研究论证。hc360慧聪网医疗器械行业频道慧聪医疗器械医疗器械医疗设备 CT B超
信息来源：孙彦平杨光


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