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α肾上腺素受体阻滞剂抑制前列腺癌细胞生长的研究(一)
    [摘要]  目的  比较两种α1肾上腺素受体阻滞剂特拉唑嗪和阿夫唑嗪，α1肾上腺素受体阻滞剂酚苄明对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3和DU-145的作用。方法  将5、10μmol／L浓度的特拉唑嗪、阿夫唑嗪与酚苄明与PC-3、DU-145细胞共培养，检测上述3种药物对PC-3和DU-145细胞系细胞存活百分率、癌细胞集落形成能力及细胞周期的影响。结果  特拉唑嗪能将雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3和DU-145阻滞在G1期，从而抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3和DU-145的生长及癌细胞集落形成的能力。阿夫唑嗪和酚苄明对PC-3和DUl45的生长及癌细胞集落形成能力无明显影响。结论  特拉唑嗪能通过诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞G1期阻滞来抑制其生长，考虑此药可用于治疗雄激素非依赖性前列腺癌。
     [关键词]  肾上腺受体阻滞剂；前列腺癌
    前列腺癌是影响老年男性健康的常见疾病。其治疗的关键在于前列腺癌患者采用内分泌治疗一段时间后，癌细胞由雄激素依赖性变为雄激素非依赖性，使肿瘤细胞的生长无法控制而导致内分泌治疗失败。本研究比较3种。肾上腺素受体阻滞对雄激素非依赖性前列腺癌细胞的作用，发现α1肾上腺素受体阻滞剂特拉唑嗪(terazosin)能将雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3和DU-145阻滞在G1期，从而抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3和DU-145的生长及癌细胞集落形成的能力。
    材料和方法
    1．细胞培养：本研究采用人雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3和DU-145(购自美国RockvilleMD公司)及含10％小牛血清的RPMI-1640(购自美国Life Teehnologies公司)培养基，将细胞培养于37℃二氧化碳孵箱中。
    2．药物：本研究采用2种临床常用的α1肾上腺素受体阻滞剂特拉唑嗪(购自英国Abbort公司)、阿夫唑嗪(alfuzosin)(购自法国Laboratoiressynthelabo公司)，一种临床常用的。肾上腺素受体阻滞剂酚苄明(Phenoxybenzamine)(购自新谊医药集团)，将其分别溶人含10％小牛血清的RPML1640细胞培养基中。
    3．癌细胞存活百分率分析：于12孔培养皿中，每孔加入500个PC-3或DU-145前列腺癌细胞，培养24h后，分别加入5 μmoL／L、10μmol／L不同浓度的特拉唑嗪，阿夫唑嗪和酚苄明等3种药物。其后1-9 d内，每天以细胞记数仪(美国Coulter公司)检测活细胞数，共检测9次。实验重复3次。
    4．癌细胞集落形成能力分析：呈指数生长的PC-3及DU-145细胞由培养孔中消化下来制成单细胞悬液。于6孔板中每孔加入500个细胞。培养24h后，分别加入5 μmol／L和10μmol／L浓度的特拉唑嗪、阿夫唑嗪和酚苄明等3种不同的药物。7 d后，测定细胞数在50以上的癌细胞集落。以空白对照为100％，计算在不同药物浓度下前列腺癌细胞集落形成百分率。
    5．流式细胞仪检测：采用ModFit 2.0软件及流式细胞检测仪(Coulter公司)，对不同浓度的特拉唑嗪对细胞生长周期的影响进行检测。在不同药物浓度培养基中培养1周后，用胰蛋白酶将前列腺癌细胞消化，然后用70％冰冻乙醇于4℃下固定1 h以上。检测前，已固定的前列腺癌细胞用磷酸盐缓冲液漂洗，并加入RNase酶，然后用propidium iodide(50 μg／ml)于37℃染色30min。
    6．统计学方法：采用两样本均数的t检验和x2检验。
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